Nghiên cứu xác định môi trường thích hợp nhân plb và tạo chồi từ plb giống lan phalaenopsis amabilis

Đề tài nghiên cứu môi trường nhân PLB (protocorm like body) và môi trường tạo chồi từ PLB trên giống lan hồ điệp Phalaenopsis amabilis Yubidan.

Mục đích xác định môi trường thích hợp sử dụng nhân PLB và tạo chồi từ PLB, để làm cơ sở thiết lập và hoàn thiện qui trình sản xuất cây giống hoa lan hồ điệp trên qui mô rộng. Tuy nhiên do thời gian có hạn, đề tài chỉ nghiên cứu xác định môi trường nuôi cấy của giai đoạn nhân PLB và giai đoạn tạo chồi. Đây là hai giai Đề án tốt nghiệp đoạn quan trọng của quy trình sản xuất giống hoa lan. Nó không những ảnh hưởng trực tiếp đến năng suất và chất lượng cây giống mà còn ảnh hưởng đến chất lượng hoa thương phẩm. Việc nhân PLB và tạo chồi lan hồ điệp chất lượng cao là tiền đề thúc đẩy phát triển sản xuất cây lan giống trong nươ c, góp phần khắc phục hiện tượng thiếu hụt cây giống trong sản xuất hiện nay, từng bước nâng cao trình độ kỹ thuật nhân giống và thu nhập cho người sản xuất, hạn chế sự lây lan nguồn bệnh từ nước ngoài qua con đường nhập cây giống.

NỘI DUNG:

CHƯƠNG 1 : TỔNG QUAN TÀI LIỆU ...............................................3

1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ. ............................................................................................. 3

1.2 LAN HỒ ĐIỆP (PHALAENOPSIS) ........................................................... 4

1.2.1 Nguồn gốc và phân bố. ................................................................. 4

1.2.2 Phân loại thực vật. ........................................................................ 5

1.2.3 Sự hình thành các nhóm Phalaenopsis ....................................... 6

1.2.4 Đặc điểm thực vật. ........................................................................ 8

1.2.4.1 Cơ quan dinh dưỡng. .......................................................8

1.2.4.2 Cơ quan sinh sản. ............................................................9

1.2.4.3 Môi trường thích hợp cho cây lan hồ điệp. .....................11

1.3. GIỐNG HỒ ĐIỆP Phal. amabilis Yubidan ............................................. 14

1.4 MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY MÔ THỰC VẬT ........................................ 14

1.4.1 Môi trường. .................................................................................... 14

1.4.2 Thành phần các chất khoáng ...................................................... 15

1.4.3 Carbohydrate ................................................................................ 19

1.4.4 Các vitamin .................................................................................... 20

1.4.5 Chất điều hoà sinh trưởng thực vật............................................ 21

1.4.6 Hexitol ............................................................................................ 24

Đồ án tốt nghiệp

SVTH: Nguyễn Hiền Nhơn

Ngành Công nghệ Sinh học K2005

1.4.7 Yếu tố làm đặc môi trường (Agar) ............................................. 25

1.4.8 Amino Acid ..................................................................................... 25

1.4.9 Các hợp chất tự nhiên .................................................................. 26

1.4.10 Các chất hấp thụ phenol ............................................................ 27

1.4.11 Ảnh hưởng của pH ...................................................................... 28

1.5 ĐIỀU KIỆN VÔ TRÙNG ......................................................................... 28

1.5.1 Ý nghĩa vô trùng ............................................................................ 28

1.5.2 Nguồn tạp nhiễm ........................................................................... 29

1.5.2.1 Vô trùng dụng cụ và nắp đậy môi trường.......................29

1.5.2.2 Vô trùng mô cấy .............................................................31

1.5.2.3 Vô trùng nơi thao tác cấy và tủ cấy vô trùng .................33

1.6 NHÂN GIỐNG TRUYỀN THỐNG........................................................... 34

1.6.1 Nhân giống hữu tính bằng hạt ..................................................... 34

1.6.2 Nhân giống vô tính bằng cách tách chiết .................................. 35

1.7 VI NHÂN GIỐNG PHALAENOPSIS ........................................................ 36

1.7.1 Nhân giống vô tính sử dụng chồi đỉnh ........................................ 37

1.7.2. Tái sinh chồi từ phát hoa Phalaenopsis ..................................... 38

1.7.3 Tạo mô sẹo ..................................................................................... 39

1.7.4 Tái sinh PLB từ mô lá Phalaenopsis ........................................... 41

1.7.5 Tái sinh PLB Phalaenopsis từ nhiều nguồn mô ........................ 42

1.8 PHÁT SINH PHÔI VÔ TÍNH Ở PHALAENOPSIS ................................ 44

1.8.1 Thuật ngữ ....................................................................................... 44

1.8.2 Phôi hữu tính ở thực vật họ lan ................................................... 45

1.8.3 Phát sinh phôi vô tính .................................................................. 47

1.8.4 Nuôi cấy mô sẹo ............................................................................ 49

1.8.5 Quy trình nhân giống in-vitro lan hồ điệp s?ch b?nh ............... 50

Đồ án tốt nghiệp

SVTH: Nguyễn Hiền Nhơn

Ngành Công nghệ Sinh học K2005

CHƯƠNG 2 : VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ........53

2.1 VẬT LIỆU THÍ NGHIỆM ......................................................................... 53

2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .............................................................. 53

2.2.1 Pha môi trường nuôi cấy. ............................................................. 53

2.2.2. Hấp khử trùng. ............................................................................. 55

2.2.3 Các thao tác thực hiện trong phòng cấy.................................... 55

2.3. CÁCH BỐ TRÍ THÍ NGHIỆM ................................................................ 56

2.3.1 Thí nghiệm1:Thí nghiệm xác định môi trường thích hợp nhân PLB

của lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis. Yubidan. ................................56

2.3.1.1 Cách bố trí thí nghiệm ....................................................56

2.3.1.2 Cách thực hiện ................................................................58

2.3.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát 4 môi trường tạo chồi từ PLB của lan hồ điệp

Phalaenopsis amabilis Yubidan. ............................................................58

2.3.2.1 Cách bố trí thí nghiệm ....................................................59

2.3.2.2 Cách thức thực hiện ........................................................60

2.4 XỬ LÝ SỐ LIỆU ....................................................................................................61

CHƯƠNG 3 : KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ........................................62

3.1 Thí nghiệm 1: Thí nghiệm xác định môi trường thích hợp nhân PLB của

lan hồ điệp Phalaenopsis amabilis. Yubidan ................................................... 62

3.2. Thí nghiệm 2: Thí nghiệm xác định môi trường thích hợp tạo chồi từ PLB

của lan hồ điệp Phalaenopsis amabilis Yubidan ........................................... 65

CHƯƠNG 4 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ ..............................................70

CHƯƠNG 5 TÀI LIỆU THAM KHẢO

LINK DOWNLOAD

Đề tài nghiên cứu môi trường nhân PLB (protocorm like body) và môi trường tạo chồi từ PLB trên giống lan hồ điệp Phalaenopsis amabilis Yubidan.

NỘI DUNG: