Báo cáo Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC)
12 thg 7, 2023 | 16:29

Báo cáo Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC)



1.PHƯƠNG THỨC VẬN HÀNH HPLC

1.1.Cách thức chuẩn bị mẫu

1.1.1.Mẫu thử:

+ Xử lý mẫu thử theo đúng chuyên luận, quy trình theo nguyên tắc:

+ Dung môi hòa tan hoạt chất phải hòa tan trong pha động, trong nhiều trường hợp dùng dung môi pha động để hòa tan mẫu.

+ Phải loại bỏ các chất không tan trong pha động hoặc không rửa giải được bằng cách lọc hay chiết.

+ Phải lọc và ly tâm, lọc mẫu qua màng lọc 0.2-0.45µm.

+ Nồng độ mẫu ở mức vừa phải, không vượt quá khả năng tách của cột, có thể gây ra nghẽn cột.

1.1.2.Mẫu chuẩn:

Pha dung dịch chuẩn có thành phần giống như mẫu thử trong cùng dung môi, riêng về nồng độ các thành phần giống như mẫu thử là tốt nhất, ngoài ra có thể dùng nồng độ khác nhưng phải nằm trong khoảng tuyến tính đã khảo sát của từng thành phần.

1.2.Loại cột sử dụng

Dựa vào các tài liệu, Dược điển, thành phần và tính chất các chất có trong mẫu phân tích, ta lựa chọn cột sắc ký phù hợp có thể là cột pha thuận, cột pha đảo hoặc các loại cột khác nhau.

Thường dùng 2 loại cột pha thuận (NP) và pha đảo (RP). Ngoài ra còn một số loại cột khác như cột CN, cột NH2…

1.2.1.Cột pha thuận (NP) : Silicagel trung tính

+ Pha tĩnh: Loại cột này dùng để tách các chất không phân cực hay ít phân cực. Trên bề mặt có chứa các nhóm OH phân cực ưa nước.

+ Pha động: Dung môi không phân cực hoặc ít phân cực.

1.2.2.Cột pha đảo (RP): Silicagel đã alkyl hóa

+ Pha tĩnh: Dùng để tách các chất không phân cực, ít phân cực, các chất phân cực có thể tạo cặp ion. Trên bề mặt hoạt động các nhóm OH đã bị Alkyl hóa tức là thay thế nguyên tử H bằng các mạch carbon thẳng (C8 hay C18 tương đương RP 8 hay RP 18)



LINK ĐẶT MUA TÀI LIỆU ONLINE


LINK ĐẶT MUA TÀI LIỆU ONLINE 1





LINK DOWNLOAD (UPDATING...)



1.PHƯƠNG THỨC VẬN HÀNH HPLC

1.1.Cách thức chuẩn bị mẫu

1.1.1.Mẫu thử:

+ Xử lý mẫu thử theo đúng chuyên luận, quy trình theo nguyên tắc:

+ Dung môi hòa tan hoạt chất phải hòa tan trong pha động, trong nhiều trường hợp dùng dung môi pha động để hòa tan mẫu.

+ Phải loại bỏ các chất không tan trong pha động hoặc không rửa giải được bằng cách lọc hay chiết.

+ Phải lọc và ly tâm, lọc mẫu qua màng lọc 0.2-0.45µm.

+ Nồng độ mẫu ở mức vừa phải, không vượt quá khả năng tách của cột, có thể gây ra nghẽn cột.

1.1.2.Mẫu chuẩn:

Pha dung dịch chuẩn có thành phần giống như mẫu thử trong cùng dung môi, riêng về nồng độ các thành phần giống như mẫu thử là tốt nhất, ngoài ra có thể dùng nồng độ khác nhưng phải nằm trong khoảng tuyến tính đã khảo sát của từng thành phần.

1.2.Loại cột sử dụng

Dựa vào các tài liệu, Dược điển, thành phần và tính chất các chất có trong mẫu phân tích, ta lựa chọn cột sắc ký phù hợp có thể là cột pha thuận, cột pha đảo hoặc các loại cột khác nhau.

Thường dùng 2 loại cột pha thuận (NP) và pha đảo (RP). Ngoài ra còn một số loại cột khác như cột CN, cột NH2…

1.2.1.Cột pha thuận (NP) : Silicagel trung tính

+ Pha tĩnh: Loại cột này dùng để tách các chất không phân cực hay ít phân cực. Trên bề mặt có chứa các nhóm OH phân cực ưa nước.

+ Pha động: Dung môi không phân cực hoặc ít phân cực.

1.2.2.Cột pha đảo (RP): Silicagel đã alkyl hóa

+ Pha tĩnh: Dùng để tách các chất không phân cực, ít phân cực, các chất phân cực có thể tạo cặp ion. Trên bề mặt hoạt động các nhóm OH đã bị Alkyl hóa tức là thay thế nguyên tử H bằng các mạch carbon thẳng (C8 hay C18 tương đương RP 8 hay RP 18)



LINK ĐẶT MUA TÀI LIỆU ONLINE


LINK ĐẶT MUA TÀI LIỆU ONLINE 1





LINK DOWNLOAD (UPDATING...)

M_tả

M_tả

Chuyên mục:

Không có nhận xét nào: