Nghiên cứu chiết xuất, tinh chế và xác định hoạt tính sinh học của một vài carotenoid từ cây cỏ Việt Nam dùng để sản xuất thực phẩm chức năng (Trần Thị Huyền Nga)
1 thg 10, 2024 | 14:05

Nghiên cứu chiết xuất, tinh chế và xác định hoạt tính sinh học của một vài carotenoid từ cây cỏ Việt Nam dùng để sản xuất thực phẩm chức năng (Trần Thị Huyền Nga)



Trên thị  trƣờng quốc tế,    -  carotene đƣợc chiết xuất từ  củ  cà rốt, dầu cọ  đỏ và từ  vi tảo  Dunaliella salina…; lycopene đƣợc chiết xuất từ  quả  cà chua; lutein đƣợc chiết xuất từ hoa cúc vạn thọ, zeaxanthin đƣợc chiết từ ngô vàng…

Ở  nƣớc ta có nguồn nguyên liệu carotenoid rất độc đáo và đặc hiệu là quả gấc chín. Màng đỏ  hạt gấc là nguyên liệu giàu    -  carotene và lycopene, phần cùi thịt vàng của quả gấc và lá gấc cũng chứa nhiều  - carotene.

Đất nƣớc ta với nhiều loại cây cỏ  là nguồn tài nguyên đa dạng phong phú để tìm  kiếm  thêm  các  loại  carotenoid  mới  và  dùng  làm  nguyên  liệu  để  sản  xuất  các carotenoid đang đƣợc sử  dụng rộng rãi trên thế  giới nhằm cung cấp cho nhu cầu sử dụng làm thuốc, mỹ  phẩm, phẩm màu, phụ  gia thức ăn của gia cầm, cá, tôm… và còn có nhiều tiềm năng xuất khẩu. 

Từ  đó, chúng tôi tiến hành đề  tài  “Nghiên cứu chiết xuất, tinh chế  và xác định hoạt tính sinh học của một vài carotenoid từ  cây cỏ  Việt Nam dùng để  sản xuất thực phẩm chức năng”. 



NỘI DUNG:


CHƢƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU  ...........................................................  3

1.1. TỔNG QUAN VỀ CAROTENOID  ...............................................................  3

1.1.1. Carotenoid  .............................................................................................  3

1.1.1.1. Giới thiệu chung...............................................................................  3

1.1.1.2. Cấu trúc hóa học và phân loại các carotenoid  ...................................  3

1.1.1.3. Tính chất vật lý  ................................................................................  6

1.1.1.4. Tính chất hóa học  .............................................................................  6

1.1.2. Vai trò của các carotenoid  .....................................................................  7

1.1.2.1. Vai trò của carotenoid trong thực vật  ................................................  7

1.1.2.2. Chức năng của các carotenoit đối với đời sống động vật và sức khỏe 

con ngƣời  ......................................................................................................  8

1.1.3. Một số carotenoid điển hình  ................................................................  12

1.1.3.1. Beta-carotene  .................................................................................  12

1.1.3.2. Lycopene  .......................................................................................  14

1.1.3.3. Lutein  .............................................................................................  16

1.2. CÁC NGHIÊN CỨU VỀ THỰC PHẨM CHỨC NĂNG, DƢỢC PHẨM

PHỤC VỤ ĐỜI SỐNG  .......................................................................................  18

1.2.1. Khái niệm về thực phẩm chức năng  ....................................................  19

1.2.2. Vai trò của thực phẩm chức năng trong cuộc sống hiện đại  ...............  20

CHƢƠNG 2. NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU  ............  24

2.1. NGUYÊN LIỆU  ..........................................................................................  24

2.1.1. Nguyên liệu và đối tượng nghiên cứu  .................................................  24

2.1.2. Hóa chất và các thiết bị thí nghiệm  .....................................................  29

2.2. PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU  ................................................................  31

2.2.1. Phương pháp chiết xuất và tinh chế các carotenoid .................................31

2.2.2.  Nghiên  cứu  hoạt  tính  chống  oxy  hóa  của  các  carotenoid  tinh 

chế........................ ..................................................................................................... 36

2.2.3. Nghiên  cứu hoạt tính sinh học các carotenoid lên các dòng tế  bào ung thư in 

vitro...........................................................................................................................40  

2.2.4 Nghiên cứu tác dụng sinh học của các carotenoid lên chuột thực nghiệm theo 

phương pháp của Favari [50]...................................................................................43

CHƢƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN...................................................  46

3.1. KẾT QUẢ THU VÀ CHỌN MẪU NGHIÊN CỨU  .ERROR! BOOKMARK NOT 

DEFINED.

3.1.1. Kết quả thu mẫu và khảo sát các mẫu nghiên cứuError! Bookmark not 

defined.

3.1.2. Kết quả nghiên cứu bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao  ..Error! Bookmark 

not defined.

3.1.3 Kết qủa tinh sạch các carotenoid  ..........................................................  50

3.2. KẾT QUẢ THỬ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÁC CAROTENOIT  .......  53

3.2.1. Kết quả thử hoạt tính chống oxy hóa trong điều kiện in vitro  .............  53

3.2.1.1. Hoạt tính chống oxy hóa của các chế phẩm tinh sạch các carotenoid

lên catalase  .................................................................................................  53

3.2.1.2. Hoạt tính chống oxy hóa của các chế phẩm tinh sạch các carotenoid

lên peroxidase  .............................................................................................  55

3.2.1.3 Kết quả khả năng chống oxy hóa lên tế bào gan chuột in vitro  ........  57

3.2.2. Hoạt tính chống oxy hoá của -carotene, lycopene và lutein trong điều 

kiện in vivo trên chuột  ...................................................................................  58

3.2.2.1. Sự thay đổi trọng lƣợng trung bình chuột trƣớc và sau thí nghiệm  ..  59

3.2.2.2 Hoạt tính của catalase trong máu và chuột  ......................................  60

3.2.2.3 Hoạt tính của peroxidase trong máu và gan chuột  ............................  61

3.2.2.4 Enzyme cytochrome b5 trong máuvà gan chuột  ..............................  64

3.2.2.5. Các chỉ số GOT và GPT máu và gan chuột  ....................................  64

3.2.2.6. Kết quả làm tiêu bản đúc cắt tế bào gan chuột  ..............................  67

3.2.3. Kết quả thử nghiệm các hoạt tính của β-carotene, lycopene và lutein 

lên các dòng tế bào ung thư.  .........................................................................  69

3.2.3.1 Kết quả thử độ độc lên tế bào  ................Error! Bookmark not defined.

3.2.3.2 Kết quả cảm ứng enzyme Caspase 3 của của β-carotene, lycopene và 

lutein lên LU1 và MCF7  .............................................................................  73

3.3. KẾT QUẢ ỨNG DỤNG VÀO THỰC TẾ  ....................................................  75

3.3.1.Thực phẩm chức năng TPCN Ocpola ....................................................  77

3.3.2. Thực phẩm chức năng Kingpharocula  ..................................................  89

KẾT LUẬN  ...........................................................................................................  90

KIẾN NGHỊ  ..........................................................................................................  91 

DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ CỦA TÁC GIẢ LIÊN QUAN ĐẾN 

ĐỀ TÀI LUẬN ÁN  ...............................................................................................  92

TÀI LIỆU THAM KHẢO  .....................................................................................  94

PHỤ LỤC 1. Hình ảnh sắc ký bản mỏng các mẫu nghiên cứu

PHỤ LỤC 2. Kết quả sắc ký bản mỏng các carotenoid trong các mẫu nghiên cứu

PHỤ LỤC 3. Hình ảnh sắc ký hiệu năng cao các mẫu nghiên cứu

PHỤ LỤC 4. Kết quả sắc ký lỏng hiệu năng cao các mẫu nghiên cứu

PHỤ LỤC 5. Các bảng số liệu nghiên cứu trong luận án

PHỤ LỤC 6. Khối phổ các carotenoid

PHỤ LỤC 7. Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân các carotenoid

PHỤ LỤC 8. Chứng nhận tiêu chuẩn sản phẩm TPCNOcpola 

PHỤ LỤC 9. Chứng nhận tiêu chuẩn sản phẩm Kingpharocula










LINK DOWNLOAD (TÀI LIỆU VIP MEMBER)



Trên thị  trƣờng quốc tế,    -  carotene đƣợc chiết xuất từ  củ  cà rốt, dầu cọ  đỏ và từ  vi tảo  Dunaliella salina…; lycopene đƣợc chiết xuất từ  quả  cà chua; lutein đƣợc chiết xuất từ hoa cúc vạn thọ, zeaxanthin đƣợc chiết từ ngô vàng…

Ở  nƣớc ta có nguồn nguyên liệu carotenoid rất độc đáo và đặc hiệu là quả gấc chín. Màng đỏ  hạt gấc là nguyên liệu giàu    -  carotene và lycopene, phần cùi thịt vàng của quả gấc và lá gấc cũng chứa nhiều  - carotene.

Đất nƣớc ta với nhiều loại cây cỏ  là nguồn tài nguyên đa dạng phong phú để tìm  kiếm  thêm  các  loại  carotenoid  mới  và  dùng  làm  nguyên  liệu  để  sản  xuất  các carotenoid đang đƣợc sử  dụng rộng rãi trên thế  giới nhằm cung cấp cho nhu cầu sử dụng làm thuốc, mỹ  phẩm, phẩm màu, phụ  gia thức ăn của gia cầm, cá, tôm… và còn có nhiều tiềm năng xuất khẩu. 

Từ  đó, chúng tôi tiến hành đề  tài  “Nghiên cứu chiết xuất, tinh chế  và xác định hoạt tính sinh học của một vài carotenoid từ  cây cỏ  Việt Nam dùng để  sản xuất thực phẩm chức năng”. 



NỘI DUNG:


CHƢƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU  ...........................................................  3

1.1. TỔNG QUAN VỀ CAROTENOID  ...............................................................  3

1.1.1. Carotenoid  .............................................................................................  3

1.1.1.1. Giới thiệu chung...............................................................................  3

1.1.1.2. Cấu trúc hóa học và phân loại các carotenoid  ...................................  3

1.1.1.3. Tính chất vật lý  ................................................................................  6

1.1.1.4. Tính chất hóa học  .............................................................................  6

1.1.2. Vai trò của các carotenoid  .....................................................................  7

1.1.2.1. Vai trò của carotenoid trong thực vật  ................................................  7

1.1.2.2. Chức năng của các carotenoit đối với đời sống động vật và sức khỏe 

con ngƣời  ......................................................................................................  8

1.1.3. Một số carotenoid điển hình  ................................................................  12

1.1.3.1. Beta-carotene  .................................................................................  12

1.1.3.2. Lycopene  .......................................................................................  14

1.1.3.3. Lutein  .............................................................................................  16

1.2. CÁC NGHIÊN CỨU VỀ THỰC PHẨM CHỨC NĂNG, DƢỢC PHẨM

PHỤC VỤ ĐỜI SỐNG  .......................................................................................  18

1.2.1. Khái niệm về thực phẩm chức năng  ....................................................  19

1.2.2. Vai trò của thực phẩm chức năng trong cuộc sống hiện đại  ...............  20

CHƢƠNG 2. NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU  ............  24

2.1. NGUYÊN LIỆU  ..........................................................................................  24

2.1.1. Nguyên liệu và đối tượng nghiên cứu  .................................................  24

2.1.2. Hóa chất và các thiết bị thí nghiệm  .....................................................  29

2.2. PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU  ................................................................  31

2.2.1. Phương pháp chiết xuất và tinh chế các carotenoid .................................31

2.2.2.  Nghiên  cứu  hoạt  tính  chống  oxy  hóa  của  các  carotenoid  tinh 

chế........................ ..................................................................................................... 36

2.2.3. Nghiên  cứu hoạt tính sinh học các carotenoid lên các dòng tế  bào ung thư in 

vitro...........................................................................................................................40  

2.2.4 Nghiên cứu tác dụng sinh học của các carotenoid lên chuột thực nghiệm theo 

phương pháp của Favari [50]...................................................................................43

CHƢƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN...................................................  46

3.1. KẾT QUẢ THU VÀ CHỌN MẪU NGHIÊN CỨU  .ERROR! BOOKMARK NOT 

DEFINED.

3.1.1. Kết quả thu mẫu và khảo sát các mẫu nghiên cứuError! Bookmark not 

defined.

3.1.2. Kết quả nghiên cứu bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao  ..Error! Bookmark 

not defined.

3.1.3 Kết qủa tinh sạch các carotenoid  ..........................................................  50

3.2. KẾT QUẢ THỬ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÁC CAROTENOIT  .......  53

3.2.1. Kết quả thử hoạt tính chống oxy hóa trong điều kiện in vitro  .............  53

3.2.1.1. Hoạt tính chống oxy hóa của các chế phẩm tinh sạch các carotenoid

lên catalase  .................................................................................................  53

3.2.1.2. Hoạt tính chống oxy hóa của các chế phẩm tinh sạch các carotenoid

lên peroxidase  .............................................................................................  55

3.2.1.3 Kết quả khả năng chống oxy hóa lên tế bào gan chuột in vitro  ........  57

3.2.2. Hoạt tính chống oxy hoá của -carotene, lycopene và lutein trong điều 

kiện in vivo trên chuột  ...................................................................................  58

3.2.2.1. Sự thay đổi trọng lƣợng trung bình chuột trƣớc và sau thí nghiệm  ..  59

3.2.2.2 Hoạt tính của catalase trong máu và chuột  ......................................  60

3.2.2.3 Hoạt tính của peroxidase trong máu và gan chuột  ............................  61

3.2.2.4 Enzyme cytochrome b5 trong máuvà gan chuột  ..............................  64

3.2.2.5. Các chỉ số GOT và GPT máu và gan chuột  ....................................  64

3.2.2.6. Kết quả làm tiêu bản đúc cắt tế bào gan chuột  ..............................  67

3.2.3. Kết quả thử nghiệm các hoạt tính của β-carotene, lycopene và lutein 

lên các dòng tế bào ung thư.  .........................................................................  69

3.2.3.1 Kết quả thử độ độc lên tế bào  ................Error! Bookmark not defined.

3.2.3.2 Kết quả cảm ứng enzyme Caspase 3 của của β-carotene, lycopene và 

lutein lên LU1 và MCF7  .............................................................................  73

3.3. KẾT QUẢ ỨNG DỤNG VÀO THỰC TẾ  ....................................................  75

3.3.1.Thực phẩm chức năng TPCN Ocpola ....................................................  77

3.3.2. Thực phẩm chức năng Kingpharocula  ..................................................  89

KẾT LUẬN  ...........................................................................................................  90

KIẾN NGHỊ  ..........................................................................................................  91 

DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ CỦA TÁC GIẢ LIÊN QUAN ĐẾN 

ĐỀ TÀI LUẬN ÁN  ...............................................................................................  92

TÀI LIỆU THAM KHẢO  .....................................................................................  94

PHỤ LỤC 1. Hình ảnh sắc ký bản mỏng các mẫu nghiên cứu

PHỤ LỤC 2. Kết quả sắc ký bản mỏng các carotenoid trong các mẫu nghiên cứu

PHỤ LỤC 3. Hình ảnh sắc ký hiệu năng cao các mẫu nghiên cứu

PHỤ LỤC 4. Kết quả sắc ký lỏng hiệu năng cao các mẫu nghiên cứu

PHỤ LỤC 5. Các bảng số liệu nghiên cứu trong luận án

PHỤ LỤC 6. Khối phổ các carotenoid

PHỤ LỤC 7. Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân các carotenoid

PHỤ LỤC 8. Chứng nhận tiêu chuẩn sản phẩm TPCNOcpola 

PHỤ LỤC 9. Chứng nhận tiêu chuẩn sản phẩm Kingpharocula










LINK DOWNLOAD (TÀI LIỆU VIP MEMBER)

M_tả
M_tả

Chuyên mục:

Không có nhận xét nào: