Luận án Nghiên cứu đột biến gen G6PD ở một số dân tộc miền Bắc Việt Nam (Ngô Thị Thảo) Full

Nhằm củng cố thêm chẩn đoán chính xác bệnh đặc biệt là các trường hợp nữ dị hợp tử và đóng góp vào cơ sở dữ liệu về nghiên cứu bệnh thiếu enzyme G6PD tại Việt Nam trên nhóm dân tộc khác nhau, giúp cho chẩn đoán người lành mang bệnh, tư vấn di truyền trước sinh nhằm giảm tỉ lệ mắc bệnh, giảm hậu quả cho gia đình bệnh nhân và xã hội, nâng cao chất lượng chăm sóc sức khỏe trong cộng đồng, chúng tôi tiến hành đề tài “Nghiên cứu đột biến gen G6PD ở một số dân tộc miền Bắc Việt Nam” với mục tiêu:

1. Xác định đột biến của gen G6PD ở bệnh nhân thiếu hụt enzyme G6PD thuộc một số dân tộc miền Bắc Việt Nam bằng kỹ thuật giải trình tự gen.

2. Phân tích đột biến gen G6PD ở một số gia đình bệnh nhi thiếu hụt của nhóm nghiên cứu.

NỘI DUNG:

Chƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU ...................................................................... 3

1.1. Tổng quan về enzyme G6PD ........................................................................... 3

1.1.1. Đặc điểm cấu trúc của enzyme G6PD .................................................... 3

1.1.2. Chức năng của enzyme G6PD ............................................................... 4

1.2. Bệnh thiếu enzyme G6PD ............................................................................... 6

1.2.1. Đặc điểm lâm sàng và sinh lý bệnh thiếu enzyme G6PD ...................... 7

1.2.2. Triệu chứng cận lâm sàng và các xét nghiệm xác định chẩn đoán

G6PD ................................................................................................... 12

1.2.3. Phân loại ............................................................................................... 14

1.2.4. Chẩn đoán ............................................................................................. 16

1.2.5. Điều trị và phòng bệnh ......................................................................... 18

1.3. Đặc điểm di truyền, đột biến gen G6PD ........................................................ 19

1.3.1. Đặc điểm di truyền ............................................................................... 19

1.3.2. Đặc điểm về gen và đột biến gen G6PD .............................................. 23

1.3.3. Phân bố dạng đột biến theo địa lý ........................................................ 28

1.4. Các phương pháp sinh học phân tử phát hiện đột biến G6PD ....................... 30

1.4.1. Phương pháp PCR (Polymerase chain Reaction) ................................. 31

1.4.2. Giải trình tự gen (DNA sequencing). ................................................... 34

1.5. Tổng quan tình hình nghiên cứu trên thế giới và Việt Nam .......................... 37

1.5.1. Trên thế giới ......................................................................................... 37

1.5.2. Tại Việt Nam ........................................................................................ 39

Chƣơng 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ....................... 41

2.1. Đối tượng nghiên cứu .................................................................................... 41

2.2. Thời gian và địa điểm nghiên cứu ................................................................. 42

2.3. Phương pháp nghiên cứu ............................................................................... 42

2.3.1. Thiết kế nghiên cứu. ............................................................................. 42

2.3.2. Cỡ mẫu nghiên cứu .............................................................................. 42

2.3.3. Chỉ số và nội dung nghiên cứu ............................................................. 43

2.4. Vật liệu và các kỹ thuật sử dụng trong nghiên cứu ....................................... 46

2.4.1. Vật liệu ................................................................................................. 46

2.4.2. Các kỹ thuật xét nghiệm trong nghiên cứu .......................................... 46

2.5. Phân tích và xử lý kết quả .............................................................................. 54

2.6. Các sai số và biện pháp khắc phục: ............................................................... 55

2.7. Vấn đề đạo đức trong nghiên cứu .................................................................. 55

CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU.............................................................. 57

3.1. Một số đặc điểm chung của nhóm nghiên cứu .............................................. 57

3.1.1. Đặc điểm về tuổi và giới ...................................................................... 57

3.1.2. Đặc điểm về địa dư ............................................................................... 58

3.1.3. Đặc điểm về dân tộc ............................................................................. 59

3.1.4. Đặc điểm về các chỉ số hồng cầu ......................................................... 59

3.2. Xác định các đột biến gen G6PD ................................................................... 60

3.2.1. Kết quả tách chiết DNA ....................................................................... 60

3.2.2. Kết quả chạy PCR khuếch đại các exon............................................... 60

3.2.3. Kết quả giải trình tự gen xác định đột biến .......................................... 62

3.3. Phân tích đột biến gen G6PD ở một số gia đình bệnh nhi ............................. 76

3.3.1. Một số đặc điểm địa dư, dân tộc của các gia đình ............................... 76

3.3.2. Tỷ lệ thiếu enzyme và đột biến gen G6PD các gia đình ...................... 77

3.3.3. Đặc điểm các loại đột biến với nồng độ enzyme và kiểu di truyền gen

G6PD trong các gia đình: .................................................................... 79

Chƣơng 4: BÀN LUẬN ........................................................................................... 86

4.1. Một số đặc điểm chung của đối tượng nghiên cứu ........................................ 86

4.1.1. Đặc điểm về tuổi, giới, địa dư và dân tộc ........................................... 86

4.1.2. Đặc điểm các chỉ số hồng cầu .............................................................. 91

4.2. Xác định các đột biến gen G6PD ................................................................... 92

4.2.1. Kết quả tách chiết DNA ....................................................................... 92

4.2.2. Kết quả phản ứng PCR khuếch đại các exon ....................................... 93

4.2.3. Kết quả giải trình tự gen xác định đột biến .......................................... 95

4.3. Phân tích đột biến gen G6PD ở một số gia đình .......................................... 124

4.3.1. Một số đặc điểm địa dư, dân tộc của các gia đình ............................. 124

4.3.2. Phát hiện thiếu enzyme và đột biến gen G6PD các gia đình ............. 124

4.3.3. Đặc điểm về nồng độ enzyme và di truyền các biến thể của gen G6PD

trong các gia đình: ............................................................................. 126

KẾT LUẬN ............................................................................................................ 131

KIẾN NGHỊ ........................................................................................................... 132

DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH NGHIÊN CỨU ĐÃ CÔNG BỐ

LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN

TÀI LIỆU THAM KHẢO

PHỤ LỤC

LINK 1 - TÌM KIẾM SÁCH/TÀI LIỆU ONLINE (GIÁ ƯU ĐÃI NHẤT)

LINK 2 - TÌM KIẾM SÁCH/TÀI LIỆU ONLINE (GIÁ ƯU ĐÃI NHẤT)

LINK 3 - TÌM KIẾM SÁCH/TÀI LIỆU ONLINE (GIÁ ƯU ĐÃI NHẤT)

LINK 4 - TÌM KIẾM SÁCH/TÀI LIỆU ONLINE (GIÁ ƯU ĐÃI NHẤT)

LINK DOWNLOAD (TÀI LIỆU VIP MEMBER)