TỔNG HỢP TÀI LIỆU - Nghiên cứu nhân giống in vitro một số dòng Lan Huệ (Update liên tục)
Lan huệ (Hippeastrum equestre)là một trong những loài hoa được yêu thích và rất có tiềm năng phát triển trong những năm gần đây. Lan huệ được trồng khá phổ biến để làm cảnh do màu sắc đa dạng, khả năng thương mại cao khi là hoa cắt cành hoặc được trồng trong chậu cảnh hay vào các dịp lễ, tết. Bên cạnh đó, đây còn là cây thuốc chữa bệnh vì theo đông y trong củ của nó có chứa các thành phần biệt dược có giá trị như các ankaloids [21], các lectins có khả năng chống ung thư, cầm máu, chữa lành vết thương…
Lan huệ ở Việt Nam hiện nay còn nghèo nàn về màu sắc (chủ yếu là màu đỏ), thời gian ra hoa của chúng lại khá muộn (khoảng từ giữa tháng 3 đến cuối tháng 5)nên khả năng phát triển loài hoa này còn rất nhiều hạn chế.Bằng con đường thu thập nguồn gen, lai hữu tính và chọn lọc có thể làm phong phú bộ giống hoa Lan huệ ở nước ta. Năm 2009 – 2010, Nguyễn Hạnh Hoa và cộng sự đã chọn tạo ra hàng loạt con lai có màu sắc lạ, đẹp, đa dạng, hoa có độ bền lâu và có thời gian ra hoa đáp ứng đúng thị trường, điển hình là các dòng H2, H4, H9, H10, H18. Tuy nhiên, các dòng Lan huệ này lại có nhược điểm là sinh sản vô tính kém (trong điều kiện tự nhiên), đặc biệt là các dòng Lan huệ H2, H4 và H18. Do vậy, những cá thể lai có đặc điểm ưu tú được chọn lọc cần phải nhân giống vô tính nhằm duy trì được tính trạng ban đầu.Từ nhiều năm nay, để nhân giống vô tính cây Lan huệ có thể sử dụng các phương pháp: Tách chồi hoặc củ nhỏ từ cụm cây mẹ; kỹ thuật cắt lát (Chipping); nhân giống bằng hạt; sử dụng phương pháp nhân giống in vitro. Mặc dù đơn giản nhưng hiệu quả khi nhân giống bằng phương pháp truyền thống không cao do thời gian nhân giống dài, hệ số nhân thấp, cây không đồng nhất cũng như không tạo được cây sạch bệnh. Phương pháp nhân giống in vitro đã khắc phục được những nhược điểm đó tạo được cây con sạch bệnh, thời gian nhân giống ngắn, hệ số nhân giống cao, cây đồng nhất, do vậy đáp ứng được nhu cầu về số lượng giống có chất lượng cao và tính di truyền ổn định. Để đánh giá và duy trì nguồn vật liệu thì việc nghiên cứu nhân giống vô tính các dòng Lan huệ trên là rất cần thiết. Năm 2009 –2010, một số tác giả trong nướcđã bước đầu xác định kết quả để xây dựng quy trình nhân nhanh in vitro hoa Loa kèn đỏ nhung (H. equestre Herb.) vàcây Lan huệ mạng (H. reticulatum var. striatifolium) [10,11]. Bên cạnh việc kế thừa một số kết quả trên cần phải có những nghiên cứu tiếp theo nhằm bổ sung và hoàn thiện quy trình nhân giống in vitro cây hoa Lan huệ để nhân nhanh nguồn gen ưu tú phục vụ cho công tác chọn tạo giống. Xuất phát từ những yêu cầu đó, chúng tôi tiến hành đề tài:“Nghiên cứu nhân giống in vitro một số dòng Lan huệ (Hippeastrum equestre)”.
NỘI DUNG:
Chương 1 - TỔNG QUAN................................................................................... 3
1.1. Giới thiệu chung về cây Lan huệ ..................................................................... 3
1.1.1. Đặc điểm thực vật học và phân bố của cây Lan huệ ....................................... 3
1.1.2. Giá trị kinh tế và sử dụng ............................................................................... 5
1.2. Một số phương pháp nhân giống vô tính cây Lan huệ ................................... 6
1.2.1. Phương pháp tách củ con .............................................................................. 6
1.2.2. Phương pháp cắt lát ...................................................................................... 7
1.2.3. Phương pháp nhân giống in vitro ................................................................... 9
1.3. Quy trình sản xuất cây nuôi cấy mô .............................................................. 20
1.3.1. Lấy mẫu và xử lý mẫu ................................................................................. 20
1.3.2. Tái sinh mẫu nuôi cấy .................................................................................. 21
1.3.3. Nhân nhanh chồi .......................................................................................... 21
1.3.4. Tái sinh rễ .................................................................................................... 21
1.3.5. Chuyển cây ra vườn ươm ............................................................................. 22
1.4. Tình hình nghiên cứu về cây Lan huệ........................................................... 22
1.4.1. Tình hình nghiên cứu cây Lan huệ trên thế giới ........................................... 22
1.4.2. Tình hình nghiên cứu cây Lan huệ ở Việt Nam ............................................ 24
Chương 2 – VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU....................... 26
2.1. Đối tượng, vật liệu, địa điểm và thời gian nghiên cứu .................................. 26
2.1.1. Đối tượng .................................................................................................... 26
2.1.2 Vật liệu ......................................................................................................... 27
2.1.3. Điều kiện nuôi cấy ....................................................................................... 28
2.1.4. Địa điểm và thời gian nghiên cứu ................................................................ 28
2.2. Phương pháp bố trí thí nghiệm..................................................................... 28
2.2.1. Giai đoạn nuôi cấy khởi động ..................................................................... 29
2.2.2. Giai đoạn nhân nhanh ................................................................................. 29
2.2.3. Giai đoạn tạo cây hoàn chỉnh ....................................................................... 32
2.2.4. Giai đoạn vườn ươm ................................................................................... 33
2.3. Các chỉ tiêu theo dõi ...................................................................................... 33
2.4. Phương pháp tiến hành ................................................................................. 34
2.5. Phương pháp xử lý số liệu ............................................................................. 37
Chương 3 - KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ........................................................ 38
3.1. Nghiên cứu phương pháp khử trùng mẫu tạo nguồn vật liệu nuôi cấy cho
nhân giống in vitro các dòng Lan huệ ......................................................... 38
Xác định thời gian khử trùng thích hợp ......................................................... 38
3.2. Ảnh hưởng của nhóm chất điều hòa sinh trưởng riêng rẽ và phối hợp đến
sự phát sinh chồi và hệ số nhân từ vảy củ đôi ............................................. 39
3.2.1. Ảnh hưởng của BA tới sự phát sinh chồi của mẫu nuôi cấy ......................... 40
3.2.2. Ảnh hưởng của sự phối hợp BA và Kinetin đến khả năng phát sinh chồi từ
vảy củ đôi ..................................................................................................... 41
3.2.3. Ảnh hưởng của sự phối hợp hai nhóm chất auxin và cytokinin đến khả năng nhân nhanh ch
3.3. Nghiên cứu khả năng phát sinh hình thái và nhân nhanh từ đế củ ............. 45
3.3.1. Ảnh hưởng của 2,4-D tới khả năng phát sinh hình thái từ đế củ ................... 45
3.3.2 Ảnh hưởng của α-NAA tới sự phát sinh hình thái từ đế củ ............................ 46
3.3.3. Nghiên cứu ảnh hưởng của BA và α-NAA đến khả năng phát sinh hình thái
từ đế củ ......................................................................................................... 50
3.4. Nghiên cứu ảnh hưởng của thành phần môi trường tới chất lượng chồi in
vitro của 5 dòng Lan huệ ............................................................................. 54
3.4.1. Ảnh hưởng của hàm lượng nước dừa tới chất lượng chồi in vitro ................. 54
3.4.2. Ảnh hưởng của hàm lượng đường tới chất lượng chồi in vitro ..................... 57
3.5. Nghiên cứu ra rễ tạo cây hoàn chỉnh ........................................................... 57
3.5.1. Ảnh hưởng của IBA tới khả năng ra rễ và chất lượng rễ.............................. 58
3.5.2. Ảnh hưởng của than hoạt tính tới khả năng ra rễ và chất lượng rễ ............... 61
3.6. Nghiên cứu ảnh hưởng của một số loại giá thể đến tỷ lệ sống và sinh
trưởng và phát triển của cây Lan huệ sau in vitro ngoài vườn ươm ........... 61
KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ ................................................................................ 66
Kết luận ................................................................................................................ 66
Đề nghị ................................................................................................................. 67
TÀI LIỆU THAM KHẢO ................................................................................. 68
PHỤ LỤC
LINK 3 - TÌM KIẾM SÁCH/TÀI LIỆU ONLINE (GIÁ ƯU ĐÃI NHẤT)
LINK 4 - TÌM KIẾM SÁCH/TÀI LIỆU ONLINE (GIÁ ƯU ĐÃI NHẤT)
Lan huệ (Hippeastrum equestre)là một trong những loài hoa được yêu thích và rất có tiềm năng phát triển trong những năm gần đây. Lan huệ được trồng khá phổ biến để làm cảnh do màu sắc đa dạng, khả năng thương mại cao khi là hoa cắt cành hoặc được trồng trong chậu cảnh hay vào các dịp lễ, tết. Bên cạnh đó, đây còn là cây thuốc chữa bệnh vì theo đông y trong củ của nó có chứa các thành phần biệt dược có giá trị như các ankaloids [21], các lectins có khả năng chống ung thư, cầm máu, chữa lành vết thương…
Lan huệ ở Việt Nam hiện nay còn nghèo nàn về màu sắc (chủ yếu là màu đỏ), thời gian ra hoa của chúng lại khá muộn (khoảng từ giữa tháng 3 đến cuối tháng 5)nên khả năng phát triển loài hoa này còn rất nhiều hạn chế.Bằng con đường thu thập nguồn gen, lai hữu tính và chọn lọc có thể làm phong phú bộ giống hoa Lan huệ ở nước ta. Năm 2009 – 2010, Nguyễn Hạnh Hoa và cộng sự đã chọn tạo ra hàng loạt con lai có màu sắc lạ, đẹp, đa dạng, hoa có độ bền lâu và có thời gian ra hoa đáp ứng đúng thị trường, điển hình là các dòng H2, H4, H9, H10, H18. Tuy nhiên, các dòng Lan huệ này lại có nhược điểm là sinh sản vô tính kém (trong điều kiện tự nhiên), đặc biệt là các dòng Lan huệ H2, H4 và H18. Do vậy, những cá thể lai có đặc điểm ưu tú được chọn lọc cần phải nhân giống vô tính nhằm duy trì được tính trạng ban đầu.Từ nhiều năm nay, để nhân giống vô tính cây Lan huệ có thể sử dụng các phương pháp: Tách chồi hoặc củ nhỏ từ cụm cây mẹ; kỹ thuật cắt lát (Chipping); nhân giống bằng hạt; sử dụng phương pháp nhân giống in vitro. Mặc dù đơn giản nhưng hiệu quả khi nhân giống bằng phương pháp truyền thống không cao do thời gian nhân giống dài, hệ số nhân thấp, cây không đồng nhất cũng như không tạo được cây sạch bệnh. Phương pháp nhân giống in vitro đã khắc phục được những nhược điểm đó tạo được cây con sạch bệnh, thời gian nhân giống ngắn, hệ số nhân giống cao, cây đồng nhất, do vậy đáp ứng được nhu cầu về số lượng giống có chất lượng cao và tính di truyền ổn định. Để đánh giá và duy trì nguồn vật liệu thì việc nghiên cứu nhân giống vô tính các dòng Lan huệ trên là rất cần thiết. Năm 2009 –2010, một số tác giả trong nướcđã bước đầu xác định kết quả để xây dựng quy trình nhân nhanh in vitro hoa Loa kèn đỏ nhung (H. equestre Herb.) vàcây Lan huệ mạng (H. reticulatum var. striatifolium) [10,11]. Bên cạnh việc kế thừa một số kết quả trên cần phải có những nghiên cứu tiếp theo nhằm bổ sung và hoàn thiện quy trình nhân giống in vitro cây hoa Lan huệ để nhân nhanh nguồn gen ưu tú phục vụ cho công tác chọn tạo giống. Xuất phát từ những yêu cầu đó, chúng tôi tiến hành đề tài:“Nghiên cứu nhân giống in vitro một số dòng Lan huệ (Hippeastrum equestre)”.
NỘI DUNG:
Chương 1 - TỔNG QUAN................................................................................... 3
1.1. Giới thiệu chung về cây Lan huệ ..................................................................... 3
1.1.1. Đặc điểm thực vật học và phân bố của cây Lan huệ ....................................... 3
1.1.2. Giá trị kinh tế và sử dụng ............................................................................... 5
1.2. Một số phương pháp nhân giống vô tính cây Lan huệ ................................... 6
1.2.1. Phương pháp tách củ con .............................................................................. 6
1.2.2. Phương pháp cắt lát ...................................................................................... 7
1.2.3. Phương pháp nhân giống in vitro ................................................................... 9
1.3. Quy trình sản xuất cây nuôi cấy mô .............................................................. 20
1.3.1. Lấy mẫu và xử lý mẫu ................................................................................. 20
1.3.2. Tái sinh mẫu nuôi cấy .................................................................................. 21
1.3.3. Nhân nhanh chồi .......................................................................................... 21
1.3.4. Tái sinh rễ .................................................................................................... 21
1.3.5. Chuyển cây ra vườn ươm ............................................................................. 22
1.4. Tình hình nghiên cứu về cây Lan huệ........................................................... 22
1.4.1. Tình hình nghiên cứu cây Lan huệ trên thế giới ........................................... 22
1.4.2. Tình hình nghiên cứu cây Lan huệ ở Việt Nam ............................................ 24
Chương 2 – VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU....................... 26
2.1. Đối tượng, vật liệu, địa điểm và thời gian nghiên cứu .................................. 26
2.1.1. Đối tượng .................................................................................................... 26
2.1.2 Vật liệu ......................................................................................................... 27
2.1.3. Điều kiện nuôi cấy ....................................................................................... 28
2.1.4. Địa điểm và thời gian nghiên cứu ................................................................ 28
2.2. Phương pháp bố trí thí nghiệm..................................................................... 28
2.2.1. Giai đoạn nuôi cấy khởi động ..................................................................... 29
2.2.2. Giai đoạn nhân nhanh ................................................................................. 29
2.2.3. Giai đoạn tạo cây hoàn chỉnh ....................................................................... 32
2.2.4. Giai đoạn vườn ươm ................................................................................... 33
2.3. Các chỉ tiêu theo dõi ...................................................................................... 33
2.4. Phương pháp tiến hành ................................................................................. 34
2.5. Phương pháp xử lý số liệu ............................................................................. 37
Chương 3 - KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ........................................................ 38
3.1. Nghiên cứu phương pháp khử trùng mẫu tạo nguồn vật liệu nuôi cấy cho
nhân giống in vitro các dòng Lan huệ ......................................................... 38
Xác định thời gian khử trùng thích hợp ......................................................... 38
3.2. Ảnh hưởng của nhóm chất điều hòa sinh trưởng riêng rẽ và phối hợp đến
sự phát sinh chồi và hệ số nhân từ vảy củ đôi ............................................. 39
3.2.1. Ảnh hưởng của BA tới sự phát sinh chồi của mẫu nuôi cấy ......................... 40
3.2.2. Ảnh hưởng của sự phối hợp BA và Kinetin đến khả năng phát sinh chồi từ
vảy củ đôi ..................................................................................................... 41
3.2.3. Ảnh hưởng của sự phối hợp hai nhóm chất auxin và cytokinin đến khả năng nhân nhanh ch
3.3. Nghiên cứu khả năng phát sinh hình thái và nhân nhanh từ đế củ ............. 45
3.3.1. Ảnh hưởng của 2,4-D tới khả năng phát sinh hình thái từ đế củ ................... 45
3.3.2 Ảnh hưởng của α-NAA tới sự phát sinh hình thái từ đế củ ............................ 46
3.3.3. Nghiên cứu ảnh hưởng của BA và α-NAA đến khả năng phát sinh hình thái
từ đế củ ......................................................................................................... 50
3.4. Nghiên cứu ảnh hưởng của thành phần môi trường tới chất lượng chồi in
vitro của 5 dòng Lan huệ ............................................................................. 54
3.4.1. Ảnh hưởng của hàm lượng nước dừa tới chất lượng chồi in vitro ................. 54
3.4.2. Ảnh hưởng của hàm lượng đường tới chất lượng chồi in vitro ..................... 57
3.5. Nghiên cứu ra rễ tạo cây hoàn chỉnh ........................................................... 57
3.5.1. Ảnh hưởng của IBA tới khả năng ra rễ và chất lượng rễ.............................. 58
3.5.2. Ảnh hưởng của than hoạt tính tới khả năng ra rễ và chất lượng rễ ............... 61
3.6. Nghiên cứu ảnh hưởng của một số loại giá thể đến tỷ lệ sống và sinh
trưởng và phát triển của cây Lan huệ sau in vitro ngoài vườn ươm ........... 61
KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ ................................................................................ 66
Kết luận ................................................................................................................ 66
Đề nghị ................................................................................................................. 67
TÀI LIỆU THAM KHẢO ................................................................................. 68
PHỤ LỤC
LINK 3 - TÌM KIẾM SÁCH/TÀI LIỆU ONLINE (GIÁ ƯU ĐÃI NHẤT)
LINK 4 - TÌM KIẾM SÁCH/TÀI LIỆU ONLINE (GIÁ ƯU ĐÃI NHẤT)


.png)
.png)




%20(1).png)
.png)
.png)

.png)


Không có nhận xét nào: