NGHIÊN CỨU TRÍCH LY POLYPHENOL TỪ TRÀ Camellia sinensis (L.)

Trong luận văn này, một số nguyên liệu trà tại vùng trà Bảo Lộc, Lâm Đồng được khảo sát để có những thông tin cơ bản phục vụ cho việc lựa chọn nguyên liệu trích ly polyphenol. Các yếu tố liên quan và quy trình trích ly polyphenol từ trà bằng phương pháp trích ly có hỗ trợ vi sóng được khảo sát và thiết lập.

Các kết quả đạt được từ thực nghiệm như sau:

1. Đánh giá bố phương pháp phân tích so màu, qua đó đề xuất sử dụng phương pháp Folin-ciocalteu cho quá trình phân tích hàm lượng polyphenol tổng trong dịch trích.

2. Xác định điều kiện thực hiện bằng vi sóng quá trình ức chế enzyme polyphenol oxidase của lá trà trước trích ly.

3. Khảo sát 5 giống trà tại vùng trà Bảo Lộc, Lâm Đồng và lựa chọn giống trà HAT có hàm lượng EGCG và catechin tổng cao làm nguyên liệu trích ly.

4. Xác định các thông số cho quy trình trích ly polyphenol từ lá trà bằng phương pháp trích ly có hỗ trợ vi sóng quy mô phòng thí nghiệm.

5. Thăm dò tinh chế sơ bộ dịch trích, tạo sản phẩm dạng bột có hàm lượng EGCG 35%, catechin tổng 70%, polyphenol tổng 95%.

6. Khảo sát một số tính chất kháng oxy hóa, kháng khuẩn của sản phẩm. Kết quả cho thấy sản phẩm có hoạt tính kháng oxy hóa mạnh hơn so với các chất đối chứng (vitamin C, trolox), có tiềm năng để nghiên cứu ứng dụng.

NỘI DUNG:

DANH SÁCH CÁC HÌNH - SƠ ĐỒ - BẢNG – ĐỒ THỊ ......................................VI

DANH SÁCH CÁC TỪ VIẾT TẮT ......................................................................... X

DANH SÁCH CÁC TỪ VIẾT TẮT ......................................................................... X

MỞ ĐẦU ....................................................................................................................XI

1 TỔNG QUAN ........................................................................................................... 1

1.1 Giới thiệu chung về trà .................................................................................... 1

1.1.1 Sinh thái học của trà ..................................................................................... 1

1.1.2 Phân bố trà ...................................................................................................... 2

1.1.3 Thành phần hóa học của lá trà ........................................................................ 3

1.2 Nhóm hợp chất catechin trong trà ................................................................ 8

1.2.1 Tính chất hóa lý .............................................................................................. 8

1.2.2 Sinh tổng hợp catechin trong lá trà .............................................................. 11

1.2.3 Biến đổi sinh học của hợp chất nhóm catechin trong lá trà và quá trình sản

xuất sản phẩm trà truyền thống ............................................................................... 13

1.3 Tác dụng sinh học của trà và của nhóm hợp chất catechin ....................... 15

1.3.1 Tác dụng dược lý của trà .............................................................................. 15

1.3.2 Hoạt tính kháng oxy hóa của nhóm catechin ............................................... 17

1.3.3 Ứng dụng khả năng kháng oxy hóa của trà và các chất trích ly từ trà ......... 20

1.4 Trích ly polyphenol từ trà ............................................................................. 20

1.4.1 Lựa chọn và chuẩn bị nguyên liệu ................................................................ 21

1.4.2 Phương pháp trích ly .................................................................................... 23

1.4.3 Các phương pháp trích ly hiện đại ............................................................... 24

1.4.4 Phương pháp trích ly có hỗ trợ của vi sóng .................................................. 25

2 PHƯƠNG PHÁP THỰC NGHIỆM .................................................................... 30

2.1 Mục tiêu nghiên cứu ...................................................................................... 30

2.2 Sơ đồ tiến hành thực nghiệm ........................................................................ 30

2.3 Phương pháp thực nghiệm ............................................................................ 31

2.3.1 Phương pháp phân tích HPLC ...................................................................... 31

2.3.2 Phương pháp so màu .................................................................................... 31

2.3.3 Lựa chọn nguyên liệu ................................................................................... 35

2.3.4 Phương pháp ức chế hoạt tính của enzyme .................................................. 37

2.3.5 Xác định định tính thành phần các chất trong trà ......................................... 38

2.3.6 Đánh giá hàm lượng catechin trong trà nguyên liệu .................................... 38

2.3.7 Đánh giá hàm lượng một số kim loại trong các mẫu trà .............................. 39

2.3.8 Đánh giá phương pháp trích ly có hỗ trợ bằng vi sóng ................................ 39

2.3.9 So sánh các phương pháp trích ly khác nhau ............................................... 41

2.3.10 Quá trình tinh chế sơ bộ sản phẩm .............................................................. 42

2.3.11 Đánh giá hoạt tính kháng oxy hóa in vitro ................................................... 43

2.3.12 Đánh giá hoạt tính kháng oxy hóa tiền in vivo – phương pháp MDA ......... 44

2.3.13 Đánh giá khả năng kháng khuẩn của sản phẩm polyphenol ........................ 44

3 KẾT QUẢ - BÀN LUẬN ....................................................................................... 45

3.1 Phương pháp xác định hàm lượng polyphenol tổng ................................... 45

3.1.1 Phương pháp HPLC ..................................................................................... 45

3.1.2 Phương pháp so màu .................................................................................... 47

3.1.3 Đánh giá các phương pháp ........................................................................... 51

3.2 Lựa chọn và xử lý nguyên liệu ...................................................................... 54

3.2.1 Điều kiện xử lý mất hoạt tính enzyme ......................................................... 54

3.2.2 Sơ bộ hóa thực vật trong trà ......................................................................... 59

3.2.3 Hàm lượng catechin trong các mẫu trà nguyên liệu ..................................... 60

3.2.4 Hàm lượng một số kim loại có trong mẫu nguyên liệu trà (Phương pháp

AS) 63

3.3 Đánh giá phương pháp trích ly có hỗ trợ vi sóng ........................................ 64

3.3.1 Ảnh hưởng của tỉ lệ nguyên liệu : dung môi ................................................ 64

3.3.2 Ảnh hưởng của dung môi trích ly ................................................................. 65

3.3.3 Ảnh hưởng của thời gian chiếu sóng, nguyên liệu và công suất lò .............. 68

3.3.4 Ảnh hưởng của chất kháng oxy hóa hỗ trợ .................................................. 71

3.3.5 Hiệu quả trích ly ........................................................................................... 72

3.3.6 So sánh các phương pháp trích ly khác nhau ............................................... 73

3.4 Tinh chế sơ bộ và đánh giá sản phẩm .......................................................... 74

3.4.1 Quá trình tinh chế ......................................................................................... 74

3.4.2 Tính chất sản phẩm ....................................................................................... 75

3.4.3 Đánh giá hoạt tính kháng oxi hóa in vitro của sản phẩm ............................. 76

3.4.4 Đánh giá hoạt tính kháng oxi hóa tiền in vivo của sản phẩm (phương pháp

MDA) ...................................................................................................................... 78

3.4.5 Đánh giá hoạt tính kháng khuẩn của sản phẩm ............................................ 79

4 KẾT LUẬN – ĐỀ NGHỊ ....................................................................................... 81

5 TÀI LIỆU THAM KHẢO .................................................................................... 83

PHỤ LỤC 1

PHỤ LỤC 2

LINK DOWNLOAD

Các kết quả đạt được từ thực nghiệm như sau:

2. Xác định điều kiện thực hiện bằng vi sóng quá trình ức chế enzyme polyphenol oxidase của lá trà trước trích ly.

3. Khảo sát 5 giống trà tại vùng trà Bảo Lộc, Lâm Đồng và lựa chọn giống trà HAT có hàm lượng EGCG và catechin tổng cao làm nguyên liệu trích ly.

4. Xác định các thông số cho quy trình trích ly polyphenol từ lá trà bằng phương pháp trích ly có hỗ trợ vi sóng quy mô phòng thí nghiệm.

5. Thăm dò tinh chế sơ bộ dịch trích, tạo sản phẩm dạng bột có hàm lượng EGCG 35%, catechin tổng 70%, polyphenol tổng 95%.

NỘI DUNG: