Nghiên cứu cảm ứng hình thành rễ tơ bởi chủng vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes
Cây dừa cạn Catharanthus roseus là một loài cây thảo dược từ được xem như một vị thuốc quý trong dân gian. Rễ tơ cây dừa cạn được cảm ứng bởi vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes đem đến nhiều tiềm năng ứng dụng trong sản xuất các sản phẩm chứa hợp chất thứ cấp có dược tính sinh học. Đề tài nghiên cứu khả năng xâm nhiễm của một số chủng Agrobacterium rhizogenes và những yếu tố ảnh hưởng đến khả năng cảm ứng tạo rễ tơ của Agrobacterium rhizogenes trên cây dừa cạn bằng phương pháp gây nhiễm trên mô lá in vitro bị tổn thương.
Những kết quả đạt được: Từ 5 chủng Agrobacterium rhizogenes (01, 02, 04, 17, 18) được tiến hành gây nhiễm trên hai giống dừa cạn VIN072 và VIN077, chỉ có 3 chủng 02, 04 và 18 có khả năng cảm ứng tạo rễ tơ trên giống dừa cạn VIN072 và 2 chủng 04 và 18 có khả năng cảm ứng tạo rễ tơ trên giống dừa cạn VIN077. Trong đó, chủng 18 cho tần số cảm ứng rễ tơ cao nhất trên hai giống dừa cạn.
Khảo sát điều kiện thích hợp để chủng A. rhizogenes 18 cảm ứng tạo rễ tơ cao trên các giống dừa cạn. Kết quả cho thấy, với cách ngâm mẫu lá in vitro bị tổn thương trong dịch khuẩn, chế độ ánh sáng mạnh 2200 lux, 16 giờ/ngày và bổ sung acetosyringone vào môi trường nuôi cấy khuẩn trước với nồng độ thích hợp là 100 µM (đối với giống VIN072) và nồng độ 50 µM (đối với giống VIN077) thì tần số cảm ứng tạo rễ tơ của chủng A. rhizogenes 18 sẽ cao.
NỘI DUNG:
CHƯƠNG 1 MỞ ĐẦU..................................................................................................1
1.1 Đặt vấn đề.............................................................................................................1
1.2 Mục tiêu................................................................................................................2
1.3 Nội dung nghiên cứu.............................................................................................2
1.4 Ý nghĩa.................................................................................................................. 2
CHƯƠNG 2 TỔNG QUAN...........................................................................................3
2.1 Giới thiệu về vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes................................................3
2.1.1 Vị trí phân loại...............................................................................................3
2.1.2 Phân loại [19][46]..........................................................................................3
2.1.3 Đặc điểm phân bố và hình thái [2].................................................................3
2.1.4 Đặc điểm sinh lý............................................................................................4
2.1.5 Sự cảm ứng hình thành rễ tơ bởi vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes và đặc
điểm của rễ tơ 4
2.1.6 Đặc điểm của rễ tơ cảm ứng bởi vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes...........9
2.2 Sơ lược về nguồn gốc cây dừa cạn Catharanthus roseus.....................................10
2.2.1 Vi trí phân loại và phân bố [37][18].............................................................10
2.2.2 Phân loại [28]...............................................................................................11
2.2.3 Đặc điểm thực vật học và sinh thái của cây dừa cạn [9][18]........................11
2.2.4 Các hợp chất sinh học có trong cây dừa cạn................................................12
2.2.5 Trồng trọt và thu hoạch................................................................................13
2.2.6 Công dụng từ cây dừa cạn [38][3]...............................................................14
2.3 Ứng dụng của việc cảm ứng tạo rễ tơ bằng vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes 16
2.3.1 Ứng dụng của nuôi cấy rễ tơ........................................................................16
2.3.2 Ứng dụng nuôi cấy rễ tơ cây dừa cạn cảm ứng bằng A. rhizogenes.............18
2.3.3 Tình hình ni cấy rễ tơ cây được cảm ứng bằng A. rhizogenes..................19
2.3.4 Những tồn động và triển vọng của việc nuôi cấy rễ tơ cảm ứng bởi vi khuẩn
A. rhizogenes 21
CHƯƠNG 3 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP...........................................................22
3.1 Thời gian và địa điểm tiến hành thí nghiệm........................................................22
3.2 Đối tượng nghiên cứu..........................................................................................22
3.3 Dụng cụ và hóa chất............................................................................................22
3.4 Mơi trường..........................................................................................................23
3.4.1 Môi trường bảo quản giống vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes [19].........23
3.4.2 Môi trường tăng sinh giống vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes................23
3.4.3 Môi trường nuôi cấy thực vật [7].................................................................23
3.5 Phương pháp.......................................................................................................25
3.5.1 Phương pháp bảo quản giống vi sinh vật trên môi trường YMB thạch
nghiêng [3] 25
3.5.2 Phương pháp tăng sinh vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes [3]..................25
3.5.3 Phương pháp trang đĩa vạch thẳng góc [2]...................................................25
3.5.4 Phương pháp khử trùng hạt [4]....................................................................25
3.5.5 Phương pháp nuôi cấy cây dừa cạn in vitro [4]............................................26
3.5.6 Phương pháp gây nhiễm để cảm ứng tạo rễ tơ cây dừa cạn in vitro [14].....26
3.6 Bố trí thí nghiệm.................................................................................................27
3.6.1 Thí nghiệm 1: Sàng lọc chủng vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes có khả
năng cảm ứng tạo rễ tơ cây dừa cạn......................................................................27
3.6.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng của một số điều kiện gây nhiễm...........28
CHƯƠNG 4 KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN..................................................................31
4.1 Khả năng cảm ứng tạo rễ tơ cây dừa cạn của các chủng A. rhizogenes...............31
4.2 Ảnh hưởng của một số điều kiện gây nhiễm.......................................................35
4.2.1 Ảnh hưởng cách gây nhiễm [24]..................................................................35
4.2.2 Ảnh hưởng của ánh sáng..............................................................................36
4.2.3 Ảnh hưởng cách bổ sung acetosyringone vào mơi trường đến tần số cảm ứng
hình thành rễ tơ 38
4.2.4 Ảnh hưởng của hàm lượng acetosyringone bổ sung vào dịch khuẩn...........40
CHƯƠNG 5 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ.....................................................................42
5.1 Kết luận...............................................................................................................42
5.2 Kiến nghị
LINK ĐẶT MUA TÀI LIỆU ONLINE
LINK ĐẶT MUA TÀI LIỆU ONLINE 1
LINK DOWNLOAD (UPDATING...)
Cây dừa cạn Catharanthus roseus là một loài cây thảo dược từ được xem như một vị thuốc quý trong dân gian. Rễ tơ cây dừa cạn được cảm ứng bởi vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes đem đến nhiều tiềm năng ứng dụng trong sản xuất các sản phẩm chứa hợp chất thứ cấp có dược tính sinh học. Đề tài nghiên cứu khả năng xâm nhiễm của một số chủng Agrobacterium rhizogenes và những yếu tố ảnh hưởng đến khả năng cảm ứng tạo rễ tơ của Agrobacterium rhizogenes trên cây dừa cạn bằng phương pháp gây nhiễm trên mô lá in vitro bị tổn thương.
Những kết quả đạt được: Từ 5 chủng Agrobacterium rhizogenes (01, 02, 04, 17, 18) được tiến hành gây nhiễm trên hai giống dừa cạn VIN072 và VIN077, chỉ có 3 chủng 02, 04 và 18 có khả năng cảm ứng tạo rễ tơ trên giống dừa cạn VIN072 và 2 chủng 04 và 18 có khả năng cảm ứng tạo rễ tơ trên giống dừa cạn VIN077. Trong đó, chủng 18 cho tần số cảm ứng rễ tơ cao nhất trên hai giống dừa cạn.
Khảo sát điều kiện thích hợp để chủng A. rhizogenes 18 cảm ứng tạo rễ tơ cao trên các giống dừa cạn. Kết quả cho thấy, với cách ngâm mẫu lá in vitro bị tổn thương trong dịch khuẩn, chế độ ánh sáng mạnh 2200 lux, 16 giờ/ngày và bổ sung acetosyringone vào môi trường nuôi cấy khuẩn trước với nồng độ thích hợp là 100 µM (đối với giống VIN072) và nồng độ 50 µM (đối với giống VIN077) thì tần số cảm ứng tạo rễ tơ của chủng A. rhizogenes 18 sẽ cao.
NỘI DUNG:
CHƯƠNG 1 MỞ ĐẦU..................................................................................................1
1.1 Đặt vấn đề.............................................................................................................1
1.2 Mục tiêu................................................................................................................2
1.3 Nội dung nghiên cứu.............................................................................................2
1.4 Ý nghĩa.................................................................................................................. 2
CHƯƠNG 2 TỔNG QUAN...........................................................................................3
2.1 Giới thiệu về vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes................................................3
2.1.1 Vị trí phân loại...............................................................................................3
2.1.2 Phân loại [19][46]..........................................................................................3
2.1.3 Đặc điểm phân bố và hình thái [2].................................................................3
2.1.4 Đặc điểm sinh lý............................................................................................4
2.1.5 Sự cảm ứng hình thành rễ tơ bởi vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes và đặc
điểm của rễ tơ 4
2.1.6 Đặc điểm của rễ tơ cảm ứng bởi vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes...........9
2.2 Sơ lược về nguồn gốc cây dừa cạn Catharanthus roseus.....................................10
2.2.1 Vi trí phân loại và phân bố [37][18].............................................................10
2.2.2 Phân loại [28]...............................................................................................11
2.2.3 Đặc điểm thực vật học và sinh thái của cây dừa cạn [9][18]........................11
2.2.4 Các hợp chất sinh học có trong cây dừa cạn................................................12
2.2.5 Trồng trọt và thu hoạch................................................................................13
2.2.6 Công dụng từ cây dừa cạn [38][3]...............................................................14
2.3 Ứng dụng của việc cảm ứng tạo rễ tơ bằng vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes 16
2.3.1 Ứng dụng của nuôi cấy rễ tơ........................................................................16
2.3.2 Ứng dụng nuôi cấy rễ tơ cây dừa cạn cảm ứng bằng A. rhizogenes.............18
2.3.3 Tình hình ni cấy rễ tơ cây được cảm ứng bằng A. rhizogenes..................19
2.3.4 Những tồn động và triển vọng của việc nuôi cấy rễ tơ cảm ứng bởi vi khuẩn
A. rhizogenes 21
CHƯƠNG 3 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP...........................................................22
3.1 Thời gian và địa điểm tiến hành thí nghiệm........................................................22
3.2 Đối tượng nghiên cứu..........................................................................................22
3.3 Dụng cụ và hóa chất............................................................................................22
3.4 Mơi trường..........................................................................................................23
3.4.1 Môi trường bảo quản giống vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes [19].........23
3.4.2 Môi trường tăng sinh giống vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes................23
3.4.3 Môi trường nuôi cấy thực vật [7].................................................................23
3.5 Phương pháp.......................................................................................................25
3.5.1 Phương pháp bảo quản giống vi sinh vật trên môi trường YMB thạch
nghiêng [3] 25
3.5.2 Phương pháp tăng sinh vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes [3]..................25
3.5.3 Phương pháp trang đĩa vạch thẳng góc [2]...................................................25
3.5.4 Phương pháp khử trùng hạt [4]....................................................................25
3.5.5 Phương pháp nuôi cấy cây dừa cạn in vitro [4]............................................26
3.5.6 Phương pháp gây nhiễm để cảm ứng tạo rễ tơ cây dừa cạn in vitro [14].....26
3.6 Bố trí thí nghiệm.................................................................................................27
3.6.1 Thí nghiệm 1: Sàng lọc chủng vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes có khả
năng cảm ứng tạo rễ tơ cây dừa cạn......................................................................27
3.6.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng của một số điều kiện gây nhiễm...........28
CHƯƠNG 4 KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN..................................................................31
4.1 Khả năng cảm ứng tạo rễ tơ cây dừa cạn của các chủng A. rhizogenes...............31
4.2 Ảnh hưởng của một số điều kiện gây nhiễm.......................................................35
4.2.1 Ảnh hưởng cách gây nhiễm [24]..................................................................35
4.2.2 Ảnh hưởng của ánh sáng..............................................................................36
4.2.3 Ảnh hưởng cách bổ sung acetosyringone vào mơi trường đến tần số cảm ứng
hình thành rễ tơ 38
4.2.4 Ảnh hưởng của hàm lượng acetosyringone bổ sung vào dịch khuẩn...........40
CHƯƠNG 5 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ.....................................................................42
5.1 Kết luận...............................................................................................................42
5.2 Kiến nghị
LINK ĐẶT MUA TÀI LIỆU ONLINE
LINK ĐẶT MUA TÀI LIỆU ONLINE 1
LINK DOWNLOAD (UPDATING...)


.png)
%20(1).png)

.png)
%20(1).png)
.png)


Không có nhận xét nào: