Nghiên cứu tạo dòng biến dị hình thái trên cây địa lan tím hột (Cymbidium La Bell " Anna Belle ") in vitro bằng phương pháp chiếu xạ gamma 60 Co
NỘI DUNG:
Chương 1. TỔNG QUAN ...........................................................................................3
1.1. Phương pháp tạo giống cây trồng mới bằng phóng xạ .............................. 3
1.1.1. Các khái niệm chung .................................................................................. 3
1.2.2. Lịch sử chọn giống đột biến ....................................................................... 4
1.1.3. Đột biến và các tác nhân gây đột biến ........................................................ 5
1.1.3.1. Vai trò của chọn giống bằng phương pháp vật lý ............................... 5
1.1.3.2. Các tác nhân gây đột biến và hiệu quả tạo đột biến ............................ 6
1.1.3.3. Cơ chế gây đột biến do phóng xạ ........................................................ 8
1.1.3.4. Hiệu ứng sinh học của bức xạ lên cơ thể sống .................................... 9
1.1.4. Thành tựu của công nghệ bức xạ trong việc chọn tạo giống mới ............ 11
1.1.4.1. Tình hình nghiên cứu đột biến trên thế giới ...................................... 11
1.1.4.2. Tình hình nghiên cứu đột biến tại Việt Nam..................................... 15
1.1.5. Chọn giống bằng phương pháp chiếu xạ kết hợp nuôi cấy in vitro.......... 17
1.2. Tổng quan về cây địa lan (Cymbidium) ...................................................... 19
1.2.1. Nguồn gốc và sự phân bố ......................................................................... 19
1.2.2. Đặc điểm phân loại học. ........................................................................... 20
1.2.3. Đặc điểm hình thái của Địa lan ................................................................ 20
1.2.4. Tình hình nghiên cứu cây Địa lan ............................................................ 22
1.2.5. Giá trị của Địa lan và tình hình sản xuất tại Việt Nam ............................ 25
1.3. Sơ lược về nuôi cấy mô tế bào thực vật ..................................................... 26
1.3.1. Lịch sử và những thành tựu đạt được trong nuôi cấy mô thực vật ........... 26
1.3.2. Môi trường nuôi cấy mô tế bào thực vật .................................................. 27
1.3.3. Tầm quan trọng của nuôi cấy mô tế bào thực vật..................................... 29
1.3.3.1. Ý nghĩa sinh học cơ bản .................................................................... 29
1.3.3.2. Ý nghĩa thực tiễn ............................................................................... 30
1.4. Ứng dụng chỉ thị phân tử chọn lọc dòng biến dị ...................................... 30
1.4.1. Vai trò của chỉ thị phân tử trong chọn giống cây trồng ............................ 30
1.4.2. Ứng dụng chỉ thị RAPD trong chọn giống ............................................... 31
CHƯƠNG 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP ......................................................35
2.1. Vật liệu .......................................................................................................... 35
2.1.1. Vật liệu nghiên cứu................................................................................... 35
2.1.2. Dụng cụ và thiết bị.................................................................................... 35
2.1.3. Hóa chất .................................................................................................... 37
2.1.4. Các điều kiện thí nghiệm .......................................................................... 37
2.2. Phương pháp nghiên cứu ............................................................................ 38
2.2.1. Nội dung 1. Hoàn thiện quy trình ni cấy in vitro cây Địa lan Tím
hột ............................................................................................................ 39
2.2.1.1. Thí nghiệm 1. Khảo sát điều kiện khử trùng tạo mẫu trong ống
nghiệm ............................................................................................... 39
ii
2.2.1.2. Thí nghiệm 2. Khảo sát khả năng hình thành callus từ PLB ............ 40
2.2.1.3. Thí nghiệm 3. Khảo sát khả năng nhân nhanh PLB.......................... 41
2.2.1.4. Thí nghiệm 4. Khảo sát khả năng nhân chồi của cây Địa lan ........... 42
2.2.1.5. Thí nghiệm 5. Khảo sát khả năng tái sinh cây hoàn chỉnh từ
chồi in vitro của cây Địa lan ............................................................. 43
2.2.2. Nội dung 2. Khảo sát ảnh hưởng của bức xạ gamma lên cây Địa lan...... 43
2.2.2.1. Thí nghiệm 1. Ảnh hưởng của bức xạ gamma 60Co lên sự sinh
trưởng và phát triển của mẫu Địa lan ................................................ 43
2.2.2.2. Thí nghiệm 2. Gây tạo, xác định và phân lập các biến dị ................. 45
2.2.3. Nội dung 3. Phân tích đa dạng di truyền của một số dòng biến dị
bằng kỹ thuật RAPD ................................................................................ 46
2.2.4. Phương pháp xử lý số liệu ........................................................................ 48
CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ............................................................49
3.1. Hồn thiện quy trình ni cấy in vitro cây Địa lan ................................... 49
3.1.1. Điều kiện khử trùng tạo mẫu trong ống nghiệm....................................... 49
3.1.2. Khảo sát khả năng hình thành callus từ PLB ........................................... 51
3.1.3. Khảo sát khả năng nhân nhanh PLB......................................................... 52
3.1.4. Khảo sát khả năng nhân chồi của cây Địa lan .......................................... 56
3.1.5. Khảo sát khả năng tái sinh cây hoàn chỉnh............................................... 59
3.2. Ảnh hưởng của bức xạ gamma lên cây Địa lan in vitro............................ 62
3.2.1. Ảnh hưởng của bức xạ gamma 60Co lên sự sinh trưởng và phát triển
của mẫu Địa lan ....................................................................................... 62
3.2.2. Gây tạo, xác định và phân lập các biến dị ................................................ 65
3.3. Phân tích đa dạng di truyền của một số dòng biến dị bằng
kỹ thuật RAPD .......................................................................................... 71
3.3.1. Kết quả tách chiết DNA............................................................................ 71
3.3.2. Kết quả phân tích RAPD-PCR ................................................................. 73
3.3.3. Tương quan di truyền của các mẫu Địa lan dựa trên phân tích RAPD .... 75
CHƯƠNG 4 - KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ ...........................................................77
4.1. Kết luận......................................................................................................... 77
4.2. Đề nghị .......................................................................................................... 78
DANH MỤC CƠNG TRÌNH CỦA TÁC GIẢ .........................................................79
TÀI LIỆU THAM KHẢO .........................................................................................80
PHỤ LỤC
LINK THƯ VIỆN CÁC TRƯỜNG ĐH/CĐ ĐỂ MƯỢN TÀI LIỆU/XEM ONLINE
LINK ĐẶT MUA TÀI LIỆU ONLINE
LINK ĐẶT MUA TÀI LIỆU ONLINE 1
INBOX HỖ TRỢ MUA TÀI LIỆU (90 % GIÁ GỐC)
LINK DOWNLOAD (UPDATING...)
NỘI DUNG:
Chương 1. TỔNG QUAN ...........................................................................................3
1.1. Phương pháp tạo giống cây trồng mới bằng phóng xạ .............................. 3
1.1.1. Các khái niệm chung .................................................................................. 3
1.2.2. Lịch sử chọn giống đột biến ....................................................................... 4
1.1.3. Đột biến và các tác nhân gây đột biến ........................................................ 5
1.1.3.1. Vai trò của chọn giống bằng phương pháp vật lý ............................... 5
1.1.3.2. Các tác nhân gây đột biến và hiệu quả tạo đột biến ............................ 6
1.1.3.3. Cơ chế gây đột biến do phóng xạ ........................................................ 8
1.1.3.4. Hiệu ứng sinh học của bức xạ lên cơ thể sống .................................... 9
1.1.4. Thành tựu của công nghệ bức xạ trong việc chọn tạo giống mới ............ 11
1.1.4.1. Tình hình nghiên cứu đột biến trên thế giới ...................................... 11
1.1.4.2. Tình hình nghiên cứu đột biến tại Việt Nam..................................... 15
1.1.5. Chọn giống bằng phương pháp chiếu xạ kết hợp nuôi cấy in vitro.......... 17
1.2. Tổng quan về cây địa lan (Cymbidium) ...................................................... 19
1.2.1. Nguồn gốc và sự phân bố ......................................................................... 19
1.2.2. Đặc điểm phân loại học. ........................................................................... 20
1.2.3. Đặc điểm hình thái của Địa lan ................................................................ 20
1.2.4. Tình hình nghiên cứu cây Địa lan ............................................................ 22
1.2.5. Giá trị của Địa lan và tình hình sản xuất tại Việt Nam ............................ 25
1.3. Sơ lược về nuôi cấy mô tế bào thực vật ..................................................... 26
1.3.1. Lịch sử và những thành tựu đạt được trong nuôi cấy mô thực vật ........... 26
1.3.2. Môi trường nuôi cấy mô tế bào thực vật .................................................. 27
1.3.3. Tầm quan trọng của nuôi cấy mô tế bào thực vật..................................... 29
1.3.3.1. Ý nghĩa sinh học cơ bản .................................................................... 29
1.3.3.2. Ý nghĩa thực tiễn ............................................................................... 30
1.4. Ứng dụng chỉ thị phân tử chọn lọc dòng biến dị ...................................... 30
1.4.1. Vai trò của chỉ thị phân tử trong chọn giống cây trồng ............................ 30
1.4.2. Ứng dụng chỉ thị RAPD trong chọn giống ............................................... 31
CHƯƠNG 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP ......................................................35
2.1. Vật liệu .......................................................................................................... 35
2.1.1. Vật liệu nghiên cứu................................................................................... 35
2.1.2. Dụng cụ và thiết bị.................................................................................... 35
2.1.3. Hóa chất .................................................................................................... 37
2.1.4. Các điều kiện thí nghiệm .......................................................................... 37
2.2. Phương pháp nghiên cứu ............................................................................ 38
2.2.1. Nội dung 1. Hoàn thiện quy trình ni cấy in vitro cây Địa lan Tím
hột ............................................................................................................ 39
2.2.1.1. Thí nghiệm 1. Khảo sát điều kiện khử trùng tạo mẫu trong ống
nghiệm ............................................................................................... 39
ii
2.2.1.2. Thí nghiệm 2. Khảo sát khả năng hình thành callus từ PLB ............ 40
2.2.1.3. Thí nghiệm 3. Khảo sát khả năng nhân nhanh PLB.......................... 41
2.2.1.4. Thí nghiệm 4. Khảo sát khả năng nhân chồi của cây Địa lan ........... 42
2.2.1.5. Thí nghiệm 5. Khảo sát khả năng tái sinh cây hoàn chỉnh từ
chồi in vitro của cây Địa lan ............................................................. 43
2.2.2. Nội dung 2. Khảo sát ảnh hưởng của bức xạ gamma lên cây Địa lan...... 43
2.2.2.1. Thí nghiệm 1. Ảnh hưởng của bức xạ gamma 60Co lên sự sinh
trưởng và phát triển của mẫu Địa lan ................................................ 43
2.2.2.2. Thí nghiệm 2. Gây tạo, xác định và phân lập các biến dị ................. 45
2.2.3. Nội dung 3. Phân tích đa dạng di truyền của một số dòng biến dị
bằng kỹ thuật RAPD ................................................................................ 46
2.2.4. Phương pháp xử lý số liệu ........................................................................ 48
CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ............................................................49
3.1. Hồn thiện quy trình ni cấy in vitro cây Địa lan ................................... 49
3.1.1. Điều kiện khử trùng tạo mẫu trong ống nghiệm....................................... 49
3.1.2. Khảo sát khả năng hình thành callus từ PLB ........................................... 51
3.1.3. Khảo sát khả năng nhân nhanh PLB......................................................... 52
3.1.4. Khảo sát khả năng nhân chồi của cây Địa lan .......................................... 56
3.1.5. Khảo sát khả năng tái sinh cây hoàn chỉnh............................................... 59
3.2. Ảnh hưởng của bức xạ gamma lên cây Địa lan in vitro............................ 62
3.2.1. Ảnh hưởng của bức xạ gamma 60Co lên sự sinh trưởng và phát triển
của mẫu Địa lan ....................................................................................... 62
3.2.2. Gây tạo, xác định và phân lập các biến dị ................................................ 65
3.3. Phân tích đa dạng di truyền của một số dòng biến dị bằng
kỹ thuật RAPD .......................................................................................... 71
3.3.1. Kết quả tách chiết DNA............................................................................ 71
3.3.2. Kết quả phân tích RAPD-PCR ................................................................. 73
3.3.3. Tương quan di truyền của các mẫu Địa lan dựa trên phân tích RAPD .... 75
CHƯƠNG 4 - KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ ...........................................................77
4.1. Kết luận......................................................................................................... 77
4.2. Đề nghị .......................................................................................................... 78
DANH MỤC CƠNG TRÌNH CỦA TÁC GIẢ .........................................................79
TÀI LIỆU THAM KHẢO .........................................................................................80
PHỤ LỤC
LINK THƯ VIỆN CÁC TRƯỜNG ĐH/CĐ ĐỂ MƯỢN TÀI LIỆU/XEM ONLINE
LINK ĐẶT MUA TÀI LIỆU ONLINE
LINK ĐẶT MUA TÀI LIỆU ONLINE 1
INBOX HỖ TRỢ MUA TÀI LIỆU (90 % GIÁ GỐC)
LINK DOWNLOAD (UPDATING...)

%20(1).png)

.png)
Không có nhận xét nào: